كيف يعمل اختبار المقاومة الوراثية لفيروس نقص المناعة البشرية؟

يمكن التنميط الجيني والنمط الظاهري التعرف على ، وحتى التنبؤ ، مقاومة أدوية فيروس نقص المناعة البشرية

حتى بالنسبة للأشخاص الذين يتمتعون بالالتزام الأمثل بالعلاج ، فمن المتوقع أن تتطور بعض المقاومة لفيروس نقص المناعة البشرية مع مرور الوقت بسبب الطفرات الطبيعية للفيروس. في حالات أخرى ، يمكن أن تتطور المقاومة بسرعة عندما يسمح التلاؤم دون المستوى لمقاومة فيروس نقص المناعة البشرية أن تزدهر ، مما يؤدي في نهاية المطاف إلى فشل العلاج.

عندما يحدث فشل العلاج ، يجب اختيار تركيبات أدوية بديلة من أجل قمع هذه المجموعة الجديدة من الفيروسات المقاومة.

يساعد اختبار المقاومة الوراثية في تسهيل ذلك من خلال تحديد أنواع الطفرات المقاومة في "تجمع فيروسي" للشخص ، مع التحقق من مدى قابلية هذه الفيروسات لعوامل مضادات الفيروسات القهقرية المحتملة.

تستخدم اثنتان من الأدوات الأساسية لاختبار المقاومة الجينية في فيروس نقص المناعة البشرية: الفحص الوراثي لفيروس نقص المناعة البشرية والمقايسة المظهري لفيروس نقص المناعة البشرية .

ما هو النمط الوراثي والنمط الظاهري؟

وبحسب التعريف ، فإن التركيب الجيني هو ببساطة التركيب الجيني للكائن الحي ، في حين أن النمط الظاهري هو الخصائص أو السمات المميزة لهذا الكائن الحي.

تعمل الاختبارات الوراثية (أو التنميط الجيني) على تحديد التعليمات الموروثة داخل الترميز الوراثي للخلية ، أو DNA. تؤكد المقايسة النمطية (أو النمط الظاهري) على التعبير عن تلك التعليمات تحت تأثير الظروف البيئية المختلفة.

في حين أن الترابط بين النمط الجيني والظاهرة الظاهرية ليس مطلقا ، فإن التنميط الجيني يمكن أن يكون تنبئيا في الغالب عن النمط الظاهري ، خاصة عندما تتسبب التغييرات في الشفرة الوراثية في التغييرات المتوقعة في الصفات أو الخصائص - كما في حالة تطوير مقاومة الأدوية.

من ناحية أخرى ، تؤكد نظرية الظاهرة "هنا والآن". ويهدف إلى تقييم رد فعل الكائن الحي تجاه تغييرات محددة في الضغط البيئي - مثل عندما يتعرض فيروس نقص المناعة البشرية لأدوية مختلفة و / أو تركيزات الأدوية.

شرح التنميط الجيني لفيروس نقص المناعة البشرية

عموما ، تعتبر التنميط الجيني لفيروس نقص المناعة البشرية أكثر التقنيات شيوعًا في اختبار المقاومة.

الهدف من الفحص هو الكشف عن طفرات جينية محددة في منطقة gag-pol من جينوم الفيروس (أو الشفرة الوراثية). هذه هي المنطقة التي يتم فيها ترميز الإنزيمات العكسية والإنزيمات البروتينية والإنزيمات - وهي أهداف معظم الأدوية المضادة للفيروسات العكوسة - على سلسلة الحمض النووي.

من خلال تضخيم جينوم فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) ، يمكن لفنيي المختبرات أن يتسلسلوا (أو "يرسمون") علم الوراثة للفيروس باستخدام تقنيات مختلفة للكشف عن الطفرات.

يتم تفسير الطفرات (أو تراكم الطفرات) من قبل الفنيين الذين يقومون بتحليل العلاقة بين الطفرات المحددة والفيروس "القابلية المتوقعة للعديد من الأدوية المضادة للفيروسات القهقرية. يمكن أن تساعد قواعد البيانات على الإنترنت من خلال مقارنة تسلسل الاختبار مع نمط فيروس "النوع البري" (أي فيروس نقص المناعة البشرية الذي لا يحتوي على طفرات مقاومة).

يتم استخدام تفسير هذه الاختبارات لتحديد مدى حساسية الدواء ، مع وجود عدد أكبر من الطفرات الرئيسية التي تمنح مستويات أعلى من مقاومة الأدوية .

شرح فيروس نقص المناعة البشرية Phenoytyping

يقيّم النمط الظاهري لفيروس نقص المناعة البشرية نمو فيروس نقص المناعة البشرية لدى وجود الدواء ، ثم يقارن ذلك بنمو عنصر تحكم ، فيروس من النوع البري في نفس الدواء.

كما هو الحال مع المقايسات الوراثية ، تزيد الاختبارات المظهرية من منطقة gag-pol في جينوم فيروس نقص المناعة البشرية.

ومن ثم يتم "تطويق" هذا الجزء من الشفرة الوراثية على استنساخ من النوع البري باستخدام تكنولوجيا الحمض النووي المؤتلف . يستخدم الفيروس المؤتلف الناتج لإصابة خلايا الثدييات في المختبر (في المختبر).

ثم تتعرض العينة الفيروسية لتركيزات متزايدة من الأدوية المضادة للفيروسات القهقرية المختلفة حتى يتحقق 50٪ و 90٪ من كبت الفيروس. ثم تتم مقارنة تركيزات النتائج من السيطرة ، عينة من النوع البري.

توفر التغييرات "الطية" النسبية نطاق القيمة الذي يتم تحديد قابلية الدواء. يعني التغيير بأربعة أضعاف ببساطة أن هناك حاجة إلى أربعة أضعاف كمية الدواء لتحقيق قمع الفيروس مقارنة مع ذلك من النوع البري.

كلما زادت قيمة الطية ، كلما كان الفيروس أقل عرضة للأدوية المحددة.

ثم يتم وضع هذه القيم ضمن نطاقات أقل سريرية وأعلى السريرية ، مع القيم العليا التي تمنح مستويات أعلى من مقاومة الأدوية. (انظر نموذج التقرير .)

متى يتم إجراء اختبار المقاومة الوراثية؟

في الولايات المتحدة ، يتم إجراء اختبار المقاومة الجينية بشكل تقليدي على المرضى الذين يعانون من السذاجة لتحديد ما إذا كان لديهم أي مقاومة للأدوية "مكتسبة". تشير الدراسات التي أجريت في الولايات المتحدة إلى أن ما بين 6٪ و 16٪ من الفيروسات المنقولة ستكون مقاومة لعقار مضاد للفيروسات العكسي واحد على الأقل ، في حين أن 5٪ تقاوم أكثر من صنف واحد من المخدرات.

كما يستخدم اختبار المقاومة الوراثية عندما يشتبه في مقاومة الأدوية للأفراد في العلاج. يتم إجراء الاختبار أثناء قيام المريض بإتخاذ نظام الفشل أو في غضون أربعة أسابيع من التوقف عن العلاج إذا كان الحمل الفيروسي أكبر من 500 نسخة / مل. ويفضل اختبار المورثات بشكل عام في هذه الحالات لأنها تكلف أقل ، ولديها وقت استجابة أسرع ، وتوفر حساسية أكبر للكشف عن خلائط من النوع البري والفيروس المقاوم.

ويفضل بشكل عام مزيج من الاختبارات النمطية والمظاهر الوراثية للأشخاص ذوي المقاومة المعقدة متعددة الأدوية ، وخاصة بالنسبة لأولئك الذين يتعرضون لمثبطات الأنزيم البروتيني .

_مصادر:

_{منظمة الصحة العالمية (منظمة الصحة العالمية). "وثيقة حقائق مقاومة فيروس نقص المناعة البشرية." جنيف ، سويسرا 11 أبريل 2011.}

_{كيم ، د. زيبل ، ر. Saduvala، N .؛ وآخرون. "الاتجاه في التحولات المرتبطة بمقاومة العقاقير المضادة للفيروس المسبب لمرض فيروس نقص المناعة البشرية -1: 10 مناطق لمراقبة فيروس نقص المناعة البشرية ، الولايات المتحدة ، 2007-2010". المؤتمر العشرون حول الفيروسات القهقرية والالتهابات الانتهازية. اتلانتا ، جورجيا 6 مارس 2013 ؛ خلاصة شفوية 149.}

_{المعاهد الوطنية للصحة (المعاهد الوطنية للصحة). "مبادئ توجيهية لاستخدام الأدوية المضادة للفيروسات القهقرية في البالغين والمراهقين المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية". بيثيسدا ، ماريلاند ؛ 11 أكتوبر 2013.}